CellufineTMGH-25
샘플의 탈염, 알코올 제거, 계면 활성제 제거에 사용
Cellufine GH-25는 진구형 셀룰로스 입자를 기재로 하는 탈염 컬럼입니다. 배제 한계 분자량이 3kDa이기에 단백질은 세공 내에 들어가지 않고 입자 밖으로 흘러갑니다. 한편 염류나 계면 활성제 등은 분자량이 작아서 세공 내부에 들어가기에, 단백질보다 늦게 컬럼에서 용출되어 갑니다. 이 때문에 완충액 치환 등에 사용하기에 적합합니다. 기계적 강도가 높은 셀룰로스 입자가 기재이기에 빠른 유속에서 조작할 수 있습니다. 또한 대형 컬럼에서도 사용할 수 있습니다. 이러한 강점으로 프로세스 설계의 리드 타임 단축에 기여합니다.
특징Features
- 진구형에 기계적 강도가 높은 셀룰로스 입자입니다
- 대상 샘플의 완충액 치환에 가장 적합합니다
- 다당류에 특징적인 친수성을 유지하고 있기에 비특이적 흡착이 적은 것이 특징입니다
- 팽윤시킨 상태에서 제공하기에 팽윤 조작할 필요가 없습니다
- pH 1~14에서 조작 가능합니다(0.1M HCl, 0.5M NaOH)
- 유기 용매에 내성을 지닙니다
- 오토클레이브로 멸균할 수 있습니다
이점Benefit
- 빠른 유속으로 조작할 수 있기에 조작 시간을 단축할 수 있습니다
- 대용량 샘플을 주입할 수 있습니다. 일반적인 조작 시간은 5~30분입니다. 컬럼 부피의 35%까지 샘플을 주입할 수 있습니다.
- 샘플의 비특이적 흡착이 적어 뛰어난 샘플 회수 성능을 볼 수 있습니다
- 진구형에 압축성을 지닌 담체이기에 충전이 간단합니다
- 간단한 세정으로 엔도톡신을 제거할 수 있습니다
- 일반적인 용매나 완충액 조건에서 담체 모양 변화 없이 사용할 수 있습니다.
- 오토클레이브로 멸균할 수 있습니다
특징 | |
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베이스 기재 | 셀룰로오스 입자 |
입자 크기 | ca. 40 – 130 µm |
배제 한계 분자량 | 3kD |
반복 사용성 | 회수율 98%~100% 250일간, 1000회의 반복 사용으로도 성능 열화가 보이지 않았다 |
오토클레이브 | 121 °C, 30 min. |
사용압력 | 유속 870 ml/h/cm2에서 사용 가능 (대형 컬럼 사용시) |
pH 안정성 | pH 1 – 14 |
화학 안정성 | 계면활성제나 변성제를 포함한 샘플에서도 문제없이 사용이 가능. 0.1M HCl이나 0.1M NaOH에 침지하여 30일 경과 후에도 열화는 보이지 않았다. |
보존액 | 20% 에탄올 수용액 |
유속 특성Flow Properties

Cellufine GH-25는 기계적 강도가 아주 높다.
시판하는 덱스트란 담체와 비교했을 때 2배에 가까운 내압성을 보였다.
Cellufine GH-25의 분리 특성The specific selection curve of Cellufine GH-25

1:에틸렌글리콜(M.W.62), 2:PEG(M.W.200), 3:PEG(M.W.400), 4:PEG(M.W.600), 5:PEG(M.W.1,000), 6:PEG(M.W.3,000),A:글리신 (M.W.132), C: 글리신 x3 (M.W.189), D: 글리신 x4 (M.W.246), E: 판토텐산 칼슘 (M.W.477), F: 비타민 B12 (M.W.1,355), G: 인슐린 β쇄 (M.W.3,49)
Cellufine GH-25의 특징은 독특한 분리 패턴입니다. 위 그림의 분자량과 Kav의 관계에서 알 수 있듯이 분자량 1,000과 분자량 3,000에서 Kav의 차이가 큽니다. 이는 분자량 1,000 이하 저분자 화합물과 단백질 등 고분자 화합물의 분리에 굉장히 유리하다는 것을 보여 줍니다.
응용 사례Applications
- 샘플의 동결 건조나 농축 전 탈염
- 완충액 교환
- 알코올이나 유기 용매 제거
- 벡터 정제 후 페놀 등 유해 성분 제거
- 단백질의 가용화에 사용한 계면 활성제 제거(Triton® X-100, SDS)
- 카오트로픽 시약 제거(요소, 구아니딘 등)
신속한 탈염 성능High Speed Desalting
Cellufine GH-25는 기계적 강도가 아주 높기에 대형 컬럼에서 사용하기에 가장 적합합니다. 대형 컬럼에서 사용할 수 있어 뛰어난 탈염 조작을 실현할 수 있습니다.
단백질의 탈염Protein Desalting
Cellufine GH-25를 활용해 다양한 단백질에서 탈염을 시험해 보았습니다. 단백질과 염화나트륨은 아주 정확하게 분리되며 회수율은 거의 100%입니다.

- 컬럼
- H2.6cm x H60 cm Vt = 318 ml
- 이동상
- 0.05 M 포름산암모늄
- 유속
- 36 ml/hr, 6.8 cm/hr
- 샘플
- (Ⅰ) BSA 30 mg, NaCl 150 (Ⅱ) 300 mg, NaCl 1,500 mg
- 샘플 로드량
- (Ⅰ) 2ml (Ⅱ) 8 ml

- 컬럼
- H1.6cm x H52 cm Vt = 104 ml
- 이동상
- 0.05 M 포름산암모늄
- 유속
- 42 ml/hr, 21 cm/hr
- 샘플
- 리소자임 30 mg 염화나트륨 150 mg
- 샘플 로드량
- 2ml

- 컬럼
- H1.5cm x H49 cm Vt = 86 ml
- 이동상
- 0.05 M 포름산암모늄
- 유속
- 30 ml/hr, 17 cm/hr
- 샘플
- 다양한 단백질 50 mg, NaCl 250mg
- 샘플 로드량
- 2ml
알코올 제거Alcohol Removal
혈액에서 콘의 에탄올 분획법에 따라 알부민을 회수하고 에탄올을 제거한다. Table 1은 Cellufine GH-25에 샘플을 다른 유속으로 주입했을 때를 비교한 내용이다. 유속을 변화시킨 경우에도 알코올 제거성, 알부민의 회수량에 변화는 없었다. 빠른 유속으로 주입하면 리드 타임을 단축할 수 있었다.
Run Number | 1 | 2 |
---|---|---|
제품명 | GH-25 | GH-25 |
컬럼 내경(mm) | 50 | 50 |
컬럼 높이(mm) | 680 | 670 |
컬럼 부피(ml) | 1335 | 1320 |
유속(ml/hr) | 570 | 2010 |
선속(ml/h/cm²) | 29 | 102 |
사이클 시간(hr) | 2.3 | 0.6 |
샘플 특성 | ||
샘플 로드량(ml) | 310 | 310 |
샘플 로드량(% Vt) | 23 | 23 |
알부민 농도(%) | 12 | 12 |
에탄올 농도(%) | 4.8 | 4.8 |
회수 샘플 | ||
회수액량(ml) | 546 | 525 |
희석율 | 1.8x | 1.7x |
에탄올 잔류율(%) | 0.002 | 0.01 |
알부민 회수율(%) | 97 | 98 |
Table 1인간 혈청 알부민 분획에서 에탄올 제거
산업 규모의 탈염Industrial Desalting
Cellufine GH-25는 기계적 강도가 높기에 산업 규모에서 사용할 수 있습니다.
Cellufine GH-25를 대형 컬럼(105 x 587 mm、5L)에 충전해 225L/일의 샘플량을 탈염하는 사례를 소개하겠습니다. Cellufine GH-25는 기계적 강도가 높기에 1250ml/min의 빠른 유속에서 처리할 수 있습니다. 사이클 타임은 8분/배치입니다. 샘플 주입량은 담체의 25% 부피만큼 주입했습니다.
Packing | Cellufine GH-25 |
---|---|
컬럼(mm) | 105 x 587 |
컬럼 부피 | 5.1 liters |
유속(ml/min)(liters/hr) | 1250(75 liters/hr) |
선속 | 870 ml/h/cm² |
통액 전의 샘플 성상 | 5 % w/v protein in 1.5M NaCL |
샘플 로드량 | 1.27 L (컬럼 부피의 25%) |
수율/사이클 | 63.6g |
사이클 수/일 | 180 |
샘플 양/일 | 11.4kg |
샘플 회수율 | 99.5 % |
버퍼 제거율 | 99 % (0.015M final conc.) |
샘플 희석 배율 | 1.13 |
회수 후 액량/일 | 257 liters |
일일 총 처리 용량 | 225 liters |
Table 2산업 규모의 샘플 처리 예
- Cellufine GH-25