Cellufine Phenyl EX

Cellufine Phenyl EX
항체 응집체의 플로우 스루 정제에 적합

Cellufine Phenyl EX는 독자적인 리간드 수식 기술로 항체 의약품의 응집체를 효율적으로 제거할 수 있는 크로마토그래피 충전제입니다. 항체의 응집체는 선택적으로 흡착시키고, 단량체는 그대로 플로우 스루 분획으로 회수됩니다. 이렇듯 불순물을 선택적으로 흡착시키는 플로우 스루 정제에 사용할 수 있습니다.

사양
학년	Cellufine Phenyl EX	Cellufine MAX Phenyl	Cellufine MAX Phenyl LS
기재	가교 셀룰로오스	고가교 셀룰로오스	고가교 셀룰로오스
입자 크기	ca. 40～130 μm
관능기 (리간드)	페닐기
BSA 흡착 용량 (mg/ml)	13	11	4
BSA 회수율(%)	30	40	90
작동 압력	< 0.2 MPa	< 0.3 MPa	< 0.3 MPa
pH 안정성	pH 2 ~ 13
포장 형태	20% 에탄올에 현탁

구조도Partial structure

Cellufine Phenyl EX

관능기 (페닐기)

모델 단백질을 활용한 분리 특성Model Protein Separation

소수 상호작용 크로마토그래피는 용도에 따라 최적의 리간드양, 즉 소수성의 강도가 다릅니다. 다음 그림은 Cellufine Phenyl EX, Cellufine MAX Phenyl 모델 단백질의 분리 거동을 보여 줍니다. 해당 결과를 통해 단백질의 흡착 강도는 Cellufine Phenyl EX > Cellufine MAX Phenyl임을 알 수 있습니다. 즉 소수성의 강도도 Cellufine Phenyl EX > Cellufine MAX Phenyl이 됩니다.

컬럼: 6.6 mm ID x 50 mm L
버퍼 A: 10 mM 인산 완충액 (pH 7) + 1.5 M 황산암모늄
버퍼 B: 10 mM 인산염 버퍼 (pH 7)
단백질: 리보뉴클레아제 A, α-키모트립시노겐 A, 리소자임

항체 응집체의 정제 사례Example of purification of antibody aggregates

Cellufine Phenyl EX는 단일클론항체에서 응집체를 플로우 스루 모드로 제거하는 데 최적화된 크로마토그래피 담체입니다. 단백질 A 담체로 정제 후 단일클론항체를 활용해 항체 응집체를 제거했습니다. Cellufine Phenyl EX는 낮은 전기 전도도에서 높은 응집체 제거 성능을 지닙니다. 이번에 사용한 샘플의 전기 전도도는 6mS/cm로 조정했습니다. 그렇기에 일반적인 소수 상호작용 크로마토그래피 충전제에서도 문제가 되는 높은 소금 농도로 인한 배관 등의 부식, 완충제의 석출을 억제할 수 있습니다.

컬럼: 1 mL 미니 컬럼
유속: 체류시간 4분(75cm/h)
샘플: 정제 후 mAb 6.6 mg/mL, pH 6, 6 mS/cm
항체 부하량: 93 mg_mab/mL_CV
평형화·세정: 20 mM AcOH-Tris + NaCl, pH6, 6 mS/cm

표에 제시된 바와 같이 단일클론항체의 응집체는 3.6% 존재했습니다만, Cellufine Phenyl EX에 통과시켜 0.4%까지 감소했습니다.

담체	응집체량(컬럼 전)[%]	응집체량(회수 분획)[%]	항체 회수율[%]
Cellufine Phenyl EX	3.6	0.4	87
Cellufine MAX Phenyl	3.6	1.3	99

유속 특성Pressure vs. Flow Properties

Cellufine Phenyl EX는 빠른 유속에서 사용할 수 있습니다. 이는 바이오 의약품 제조 업체가 꼭 갖추어야 할 특징입니다. Cellufine Phenyl EX는 실제 제조 시 조작 가능한 유속 특성을 갖추고 있습니다.

컬럼: 내경 2.6cm x 높이 19.3cm
온도: 23~25 ℃
이동상: 순수