개발품 소개:
Cellulose resin MLP1000 DexS
Cellulose resin MLP1000 DexS란?
Cellulose resin MLP1000은 고도로 가교한 셀룰로스 입자이며, 기공 크기가 큰 연통공 구조를 지니고 있습니다. 크기가 큰 바이러스 및 바이러스 유사 입자 정제 시 담체 내부를 흡착점으로 이용할 수 있기에 높은 흡착 성능, 정제 능력을 발휘합니다. Cellulose resin MLP1000 DexS는 MLP1000에 덱스트란 황산염을 고정화한 크로마토그래피 담체입니다. 바이러스의 정제에 가장 적합한 크로마토그래피 담체입니다.
개발품 취급 방법에 관하여
Cellulose resin MLP1000 DexS는 개발품입니다. 크로마토그래피 충전제 Cellufine은 ISO 9001로 품질을 보증받았습니다만, 본 제품은 개발 중이므로 품질이나 명칭이 변경될 수 있습니다.
본 제품은 판매하고 있지 않습니다. 개발품으로 소량의 샘플을 제공하고 있습니다. 본 제품을 제조 용도로 검토해 보고 싶으신 기업 고객(의약품 제조, 진단 시약, 그 외 제조 등), 연구자님께는 해당 내용에 동의해 주시면 용도를 감안한 후 샘플을 제공해 드리겠습니다. 샘플을 원하시는 경우 아래로 문의해 주십시오.
Cellulose resin MLP1000 DexS
Cellulose resin MLP1000 DexS는 고도로 가교한 셀룰로스 입자이며, 기공 크기가 큰 연통공 구조를 지니고 있습니다. 크기가 큰 바이러스 및 바이러스 유사 입자 정제 시 담체 내부를 흡착점으로 이용할 수 있기에 높은 흡착량, 정제 능력을 발휘합니다.
Cellulose resin MLP1000 DexS의 특징을 Table 1에서 볼 수 있습니다.
| 베이스 기재 | 가교 셀룰로오스 |
|---|---|
| 입자 직경 | 90μm (40 – 150 μm) |
| 리간드 | 덱스트란 황산기 |
| 조작압 | < 0.3MPa |
Table 1 Cellulose resin MLP1000 DexS의 특징
Cellulose resin MLP1000 DexS는 고도로 가교한 셀룰로스 입자입니다. 바이러스 입자가 들어가는 아주 큰 연통공을 지니고 있음에도 불구하고, 바이오 의약품의 생산에서 사용되는 대형 컬럼에서도 사용 가능한 내압성, 유속 특성을 갖추고 있습니다.
비활성화 인플루엔자 바이러스 정제 사례
인플루엔자 바이러스 H1N1형을 배양한 계란 유래 요막액을 이용해 크로마토그래피를 정제했습니다. 시판하는 담체 A와 비교했을 때 MLP1000 DexS는 파과가 발생하지 않고 인플루엔자 바이러스를 계속 흡착했습니다. 이 결과에서 동적 흡착량이 굉장히 높은 것을 알 수 있습니다.
컬럼：I.D. 5.0 x 15 mm (0.3 mL)
로드 샘플：닭 계란 유래의 요막액
불활성 인플루엔자 바이러스 포함
바이러스 균주：A/Hyogo/YS/2011(H1N1)
유속：0.5 ml/min(150 cm/h, R.T. 0.6 min)
평형화액：10 mM 인산 Na, 120 mM NaCl、pH 7.4
세정액：10 mM 인산 Na, 120 mM NaCl, pH 7.4
용출액：10 mM 인산 Na,2 M NaCl、pH 7.4
| 공정 | 액량 mL | 바이러스 활성 HA가 | 단백질 양 µg | dsDNA 양 µg | 회수율 % |
|---|---|---|---|---|---|
| 요막액 | 20 | 99,600 | 10,100 | 6.4 | 100 |
| 플로우 스루 | 20 | 400 | 9,220 | 3.6 | 1 |
| 세정액 | 6 | 1,560 | 786 | 0.3 | 2 |
| 용출액 | 1.5 | 92,880 | 975 | 1.4 | 93 |
Table 2 크로마토그래피 후 평가
Cellulose resin MLP1000 DexS의 크로마토그래피 이후 액체량은 20mL에서 1.5mL가 되어 13배까지 농축할 수 있었습니다. 불순물이 되는 단백질량은 10,100µg에서 975µg가 되어 9.7%까지 감소시킬 수 있었습니다. 또한 dsDNA의 양도 마찬가지로 22%까지 감소시킬 수 있었습니다. 크로마토그래피에 의해 최종적인 바이러스 회수율은 93%로 양호했습니다. 높은 흡착 성능은 Cellulose resin MLP1000 DexS의 큰 특징입니다만, 회수율도 양호한 것으로 나타났습니다.
비활성화 인간 코로나바이러스 정제 사례
인간 코로나바이러스 OC43(hCoV OC43)은 COVID-19 감염증을 일으키는 SARS-Cov-2와 같은 베타코로나바이러스 계열에 속하는, 약 100nm 크기의 일반적인 감기를 일으키는 바이러스입니다. 베로 세포로 배양한 인간 코로나바이러스 OC43의 크로마토그래피를 이용한 정제 사례를 소개하겠습니다.
컬럼：I.D. 5.0 x 15 mm (0.3 mL)
로드 샘플：베로 세포 유래 배양 상등액
불활성화된 인간 코로나 바이러스 OC43 포함
유속：0.3 ml/min(90 cm/h、R.T. 1.0 min)
평형화액：10 mM 인산 Na,150 mM NaCl、pH 7.4
세정액：10 mM 인산 Na,120 mM NaCl、pH 7.4
용출액: 10 mM 인산 Na,2 M NaCl、pH 7.4
용출1：gradient (0→25%), 25 CV
용출2：isocratic (100%), 10 CV
| 공정 | 액량 mL | 바이러스 활성 HA가 | 단백질 양 µg | dsDNA 양 µg | 회수율 % |
|---|---|---|---|---|---|
| 배양 상청액 | 34.5 | 120,186 | 6,394 | 52.79 | 100 |
| 플로우 스루 | 20 | 1,020 | 4,376 | 55.53 | 0.8 |
| 세정액 | 6 | 90 | 57 | 2.25 | 0.1 |
| 용출액(gradient, isocratic) | 1.5 | 108,990 | 170 | 4.95 | 91 |
Table 3 크로마토그래피 처리 후 평가
Cellulose resin MLP1000 DexS의 크로마토그래피 처리 후, 불순물이 되는 단백질량은 6394µg에서 170µg가 되어 2.7%까지 감소시킬 수 있었습니다. 또한 dsDNA의 양도 마찬가지로 9%까지 감소시킬 수 있었습니다. 또한 회수율은 91%로 양호했습니다. MLP1000 DexS를 활용해 베타코로나바이러스속의 인간 코로나바이러스 OC43에서도 더욱 효율적인 정제가 가능하다는 것이 나타났습니다.
