CellufineTM MAX IB
混合模式填料, Cellufine™ MAX IB 专门用于蛋白A步骤后的单克隆抗体（Mab）的纯化。這款填料是通過在繊維素基球表面的耐盐多胺基団上部分的修飾了丁基。这种配体设计理念可以灵活地将Cellufine MAX IB应用于生物制药纯化的广泛领域。
Cellufine MAX IB的配体结构如图1所示
Cellufine MAX IB的规格和特性描述于下表中
| 性能 | 数值 |
|---|---|
| 基质 | 高度交联的纤维素 |
| 粒径 | 平均 90 µm |
| 显微镜检查 | < 5 % |
| 离子交换容量 | 0.10 - 0.16 meq/ml |
| BSA吸附容量 | ≥ 60 mg/ml |
| 工作压力 | < 0.3 MPa |
Cellufine™MAX IB应用
Cellufine MAX IB可用作Mab阴离子（流穿）纯化模式。 将Cellufine MAX IB装入5mmID×13.5cmL（2.65mL）层析柱中，用20mM Tris-HCL pH7.0的缓冲液平衡，流速为1.325mL / min（407cm / h）。 在通过rProtein A柱初始捕获后，将得到的60mM乙酸pH 3.5的洗脱样品在pH 3.4下保持60分钟进行病毒灭活。在该步骤之后，将样品（18.0mg / mL Mab）用Tris调节pH至pH7.0，用NaCl调电导率为6mS /cm或用上样缓冲液稀释调节。 在经过0.22μM过滤后，将澄清样品以150mg Mab / mL介质加载到MAX IB层析柱上，收集流穿+洗涤部分。 CHO-HCP、dsDNA（HCD）、浸出的rProtein A和聚集体的去除效果显示在下表1中。 以下为Cellufine MAX IB，MAX Q-h和聚合物改性琼脂糖Q竞争性介质，采用流穿纯化模式。
| Elution Buffer from ProA | HCP (ng/mg mAb) | Leak ProA (ng/mg_mAb) | Aggregate(%) | HCD (pg/mg mAb) | Recovery(%) | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Loading solution (After virus inactivation) | 60 MM Acetate Buffer(pH 3.5) | 72 | 3.0 | 1.7 | 10 | 100 |
| Cellufine MAX Q-h | 22 | 2.1 | 1.9 | < 10 | 97 | |
| Polymer modified Agarose Q | 27 | 2.1 | 1.8 | 96 | ||
| Cellufine MAX IB | 3 | 0.0 | 1.0 | 95 |
表1使用Cellufine MAX IB和两种不同的聚合物改性的Q IEX树脂进行的两步Mab纯化
[致謝]
这项开发和生产用于下一代治疗和诊断药物的关键技术研究得到了日本经济産業省（METI）和日本医療研究開発機構（AMED）两个部门的关键技术的部分支持。
化学稳定性和在线清洗
纤维素作为具有化学和物理稳定性的天然产物是众所周知的，由于Cellufine来自纤维素，因而它对化学品的腐蚀性和酸性溶液也具有良好的稳定性。 所有Cellufine填料可以用0.5M NaOH溶液进行CIP清洗。使用过的填料清洗后放置在2-25℃的20％乙醇中保存。
