Cellufine™ MAX Q-hv
Cellufine™ MAX Butyl HS
肺炎链球菌是肺炎的主要病原体之一，在全世界尤其是儿童和老年人会引发高患病率和高死亡率。 最重要的毒性因子之一是细菌表面的莢膜多糖(CPS) ，基于该莢膜多糖的肺炎球菌疫苗被用于预防这些传染病。
这里将提出无需采用乙醇沉淀的简易化2步CPS层析纯化流程提案。这种流程采用了疏水相互作用层析 (HIC)及阴离子交换层析 (AEX)。本文将介绍实现这种流程最优化的2种层析介质Cellufine MAX Butyl HS和Cellufine MAX Q-hv。
Cellufine™ MAX Q-hv 的特点
Cellufine™ MAX Q-hv 是一种强阴离子交换剂。 Cellufine™的产品线中有几款强阴离子交换剂，我们将介绍它们之间的比较。 Cellufine™ MAX Q-hv 具有优化的配体浓度，可实现荚膜多糖的最佳纯化。
| Cellufine™ MAX Q 系列比较 | |||
|---|---|---|---|
| 产品 | Cellufine™ MAX Q-r | Cellufine™ MAX Q-h | Cellufine™ MAX Q-hv |
| 底物载体 | 葡聚糖修饰的高度交联纤维素颗粒 | ||
| 粒径 | ca. 40～130 μm | ||
| 配体 | 强阴离子 / -N+(CH3)3 | ||
| 离子交换容量 (meq/ml) | 0.10～0.20 | 0.13～0.22 | 0.04～0.07 |
| 动态吸附载量 BSA (mg/ml) | >110 | >180 | >120 |
| 操作流速 | 600 cm/h(0.3 MPa) I.D.30 cm-L20 cm、流动相：纯化水 24 ºC | ||
| pH稳定性 | pH 2 - 12 | ||
| 化学稳定性 | 对常规使用的缓冲液表现稳定 | ||
| 定置洗脱 | 1 M NaOH | 0.5 M NaOH | |
| 保存液 | 20 % 乙醇水溶液 | ||
Cellufine™ MAX Q-hv 的特点
Cellufine™ MAX Butyl HS 是一种带有丁基的疏水性载体。 Cellufine™的产品线中有几种疏水性载体，我们将介绍它们之间的比较。 Cellufine™ MAX Butyl HS 具有优化的配体浓度，可实现荚膜多糖的最佳纯化。
| Cellufine™ MAX Q 系列比较 | ||
|---|---|---|
| 产品 | Cellufine™ MAX Butyl | Cellufine™ MAX Butyl HS |
| 底物载体 | 高交联纤维素 | |
| 粒径 | ca. 40～130 μm | |
| 配体 | 低浓度丁基 | 高浓度丁基 |
| BSA吸附量 (mg/ml) | ≧9 | ≧13 |
| BSA 洗脱效率 (%) | ≧70 | ≧36 |
| 运营压力 | <0.3 MPa | |
| pH稳定性 | pH 2 - 13 | |
| 化学稳定性 | 在常用缓冲液中稳定 | |
| 定置洗脱 | 1 M NaOH | |
| 保存液 | 20 % 乙醇水溶液 | |
Cellufine™ MAX Butyl HS 的分离特性
- 层析柱
- 6.6 mm ID x 30 mmL (1.0 ml)
- 缓冲 A
- 10 mM 磷酸钠，1.5 M 硫酸铵，pH 7.0
- 缓冲 B
- 10mM 磷酸钠，pH 7.0
- 蛋白质
- 核糖核酸酶 A、细胞色素 C、溶菌酶
Cellufine™ MAX Butyl HS 的流量特性
- 层析柱
- 2.2cm I.D. x 20 cm L
- 温度
- 24 ± 1 ℃
- 流动相
- 纯净水
Streptococcus pneumoniae血清型19F的莢膜多糖类的纯化
肺炎链球菌是肺炎的主要病原体之一，在全世界尤其是儿童和老年人会引发高患病率和高死亡率。 最重要的毒性因子之一是细菌表面的莢膜多糖(CPS) ，基于该莢膜多糖的肺炎球菌疫苗被用于预防这些传染病。 以往的乙醇沉淀采用以纯化适合绝大多数血清型的CPS为目的的常规流程。但是，这些工艺复杂且用时较长。其结果是肺炎球菌疫苗非常昂贵。 为了克服这些缺点，业界提出了很多经过改善的流程提案。这些流程的几项中含有层析流程。这里将提出无需采用乙醇沉淀的简易化2步CPS层析纯化流程提案。 这种流程采用了疏水相互作用层析 (HIC)及阴离子交换层析 (AEX)。本文将介绍实现这种流程最优化的2种层析介质Cellufine™ MAX Butyl HS和Cellufine™ MAX Q-hv。
| 多糖类 回収率 % | 多糖类 純度 % | 蛋白质 μg/mL | 核酸 μg/mL | 蛋白质 / 多糖类 % | 核酸 / 多糖类 % | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 试样 | - | 46 | 73 | 772 | 10 | 106 |
| MAX Butyl HS纯化后 | 89 | 54 | M.D. | 436 | 0 | 84 |
| MAX Q-hv纯化后 | 98 | 99 | N.D. | 4 | 0 | 1 |
化学稳定性Chemical and Caustic Stability
在以下溶剂和高压釜中稳定。
- 乙醇 (70%)
- 氢氧化钠(0.5M)
- 异丙醇（30%）
- 表面活性剂
- 盐酸胍(6M)
- 高压灭菌器（121 ℃，20 分钟）
- 尿素（6M）
- Cellufine™ MAX Butyl HS
- Cellufine™ MAX Q-hv
