CellufineTM MAX AminoButyl
Cellufine™ MAX AminoButyl 主要用于具有强疏水性分子的纯化浓缩,如病毒样颗粒(VLPs)。Cellufine MAX AminoButyl是在Cellufine MAX Butyl的基础上进行了优化,从而提高了靶向分子的回收率。
Cellufine MAX AminoButyl的配体结构如图1所示。

Cellufine MAX AminoButyl的规格和特性描述如表1和表2所示
项目 | |
N含量 (μmol/ml) | 20 - 33 |
洗脱体积 (ml) α-胰凝乳蛋白酶原A(HIC模式) 胃蛋白酶(IEX模式 |
12.0 - 17.0 12.0 - 17.0 |
显微镜检查 (%) | < 5 |
表1Cellufine MAX AminoButyl的规格
基质 | 高度交联的纤维素 |
粒径 | 90μm (40 – 130 μm) |
配基 | 丁基 + 伯胺 |
2M(NH 4)2 SO4中的蛋白质吸附(1) | α-胰凝乳蛋白酶原A; + 核糖核酸酶A; - 溶菌酶; - |
20mM Tris-HCl(pH7.5)中的蛋白质吸附(2) | 转铁蛋白; - BSA; + 胃蛋白酶; + |
+; 吸附, -; 没有吸附
表2Cellufine MAX AminoButyl的特征
由于基质是高度交联的纤维素粒子,Cellufine MAX AminoButyl显示出优异的流动特性 如图2所示

(条件:柱/2.2 cm ID x 20 cm,流动相/纯水(24±1℃))
Cellufine™MAX AminoButyl的应用
用Cellufine AminoButyl从酵母发酵液中纯化r-HBsAg(重组乙肝表面抗原)VLPs
将部分纯化的乙肝表面抗原(r-HBsAg)VLPs溶液上样至Cellufine MAX AminoButyl色谱柱(16mm内径×500mm高), 然后用20mm磷酸缓冲液(pH 7.0)充分冲洗色谱柱。首先用含0.1% Triton X的磷酸盐缓冲液(pH 7.0)作为洗脱液(洗脱1)。 然后用2 M NaCl洗脱液洗脱分子(洗脱2)。再对各组分进行回收分析。
下图显示了用Cellufine AminoButyl纯化乙肝表面抗原(r-HBsAg)VLPs的色谱图 。乙肝表面抗原(r-HBsAg)病毒样颗粒可用ELISA法检测

VLP病毒样颗粒 | 蛋白 | |||
---|---|---|---|---|
nU | % | ug | % | |
上样 | 4,260 | 100 | 2,320 | 100 |
流穿 | 480 | 11 | 350 | 13 |
洗脱 1 | 2,060 | 48 | 770 | 30 |
洗脱 2 | 172 | 4 | 1,190 | 46 |
下表显示了该测试结果
大多数乙肝表面抗原(r-HBsAg)在洗脱1中即可获得,蛋白质检测结果表明,一步纯化的乙肝表面抗原(r-HBsAg)经洗涤剂洗脱浓缩。结果表明,Cellufine MAX AminoButyl可用于纯化VLPs。