什么是 Cellufine MLP™?
Cellufine MLP™是一种高度交联的纤维素颗粒,具有超过1 μm的连续贯穿孔结构。颗粒内部形成了大型流通通道(Flow-through Pores),可实现流动相在颗粒内部的对流传质。因此,颗粒内部表面特别适用于吸附病毒、VLP(病毒样颗粒)等大型生物分子。
Cellufine MLP™ 的表面及孔结构


- 颗粒从表面延伸至内部具有较大的连通孔结构,而其骨架内部则含有微细孔。
- 粒子内部贯通孔的直径约为1.5 μm。
整体柱(Monolith)色谱柱的优势比较
Cellufine MLP™ 兼具填充色谱柱的灵活性和整体柱(Monolith)色谱柱般优异的传质性能。
- 兼容传统色谱柱设备。
- 可轻松放大至生产规模的纯化工艺。
- 非常适用于大规模生物工艺的纯化流程。
| 整体柱(Monolith)色谱柱 | Cellufine MLP™ | |
|---|---|---|
| 孔结构 | 大型贯通孔 | 大型贯通孔 |
| 形状 | 整体式 | 颗粒填充式 |
| 放大性能 | 有限 | 灵活兼容传统色谱柱 |
| 大规模生产运行 | 困难 | 容易 |
| 灵活性 | 较低 | 较高 |
整体柱(Monolith)色谱柱

Cellufine MLP™

优异的结合性能
Cellufine MLP™ 是一种具有大型连通孔结构的色谱填料。目标分子能够通过这些连通孔迅速进入颗粒内部,因此即使在高线流速条件下,也能保持较高的动态结合容量(DBC)。
本研究采用用于疫苗纯化的亲和色谱填料 Cellufine MLP™ DexS,评估了其对灭活流感疫苗的动态结合容量。结果表明,与传统填料相比,Cellufine MLP™ DexS 的动态结合容量提高了约 5 倍。
流速: 0.5 mL/min
样品(24 mL):甲型流感病毒(H1N1),来源于 MDCK 细胞
清洗液(6 mL):10 mM 磷酸盐缓冲液 + 0.12 M NaCl
洗脱液(2.4 mL):10 mM 磷酸盐缓冲液 + 2.0 M NaCl
Cellufine MLP™ 优异的流速特性
Cellufine MLP™ 由具有相互连通孔结构的颗粒组成,流动相能够轻松渗透至颗粒内部的整个孔结构。因此,即使在高流速条件下运行,也不会产生显著的压降。
在本研究中,为最大限度地降低壁效应的影响,采用内径 10 cm 的色谱柱填装 Cellufine MLP™,并对压降进行了评估。结果表明,即使在线速度高达 600 cm/hr 的条件下,运行压力仍仅为 0.15 MPa。
这些结果表明,Cellufine MLP™ 具有区别于传统色谱填料的优异流速特性。
柱高: 19.5 cm
装柱因子: 1.20
流动相:纯水
与传统 Cellufine™ 基质的比较
Cellufine™ 基质的 SEM 图像比较显示,不同产品具有各自独特的孔结构特征。Cellufine™ Sulfate 具有致密的孔结构,主要利用颗粒表面的吸附作用实现分离与纯化。Cellufine™ MAX 采用纤维状基质结构,凭借较大的比表面积展现出优异的蛋白质纯化性能。相比之下,Cellufine MLP™ 具有约 1,500 nm 的大孔径结构,专为疫苗、质粒 DNA、mRNA、外泌体等大型生物药物形式的纯化而优化设计。
Cellufine™ Sulfate
Cellufine™ MAX
Cellufine MLP™
| Cellufine™ Sulfate | Cellufine™ MAX | Cellufine MLP™ | |
|---|---|---|---|
| 孔径 (nm) | < 5 | 100 | 1500 |
| BET 比表面积(m²/g-干重) | 0.1 ~ 0.2 | 100 ~ 150 | 10 ~ 30 |
| 特点 | 表面吸附 | 孔内的大容量结合位点 | 大型贯通孔 |
| 主要应用领域 | 病毒 | 蛋白质 | 病毒载体、外泌体、质粒 DNA(pDNA)和 mRNA |
与传统 Cellufine™ 基质相比,Cellufine MLP™ 具有极大的孔径结构,更适用于病毒、质粒 DNA、mRNA 以及外泌体等大型生物颗粒的纯化,而不仅限于蛋白质的纯化。
内部孔结构的可及性
采用荧光微粒子(100 nm)进行的评价
将经染料(红色)染色的填料浸泡于含有 100 nm 荧光微粒子(绿色)的溶液中,并利用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察这些颗粒向填料内部孔结构扩散的过程。
传统 Cellufine™ 填料

Cellufine MLP™

- 100 nm 纳米颗粒可扩散至 MLP 颗粒内部
应用
Cellufine MLP™ 是专为大型生物颗粒纯化而开发的色谱填料,可显著提升疫苗、病毒样颗粒(VLP)、腺相关病毒(AAV)、质粒 DNA、mRNA 以及外泌体等先进生物药物形式的纯化效率。
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流感病毒 -
AAV -
抗体 -
慢病毒