什么是 Cellufine MLP™?

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什么是 Cellufine MLP™?

Cellufine MLP™ 是一种采用独特纤维素颗粒结构的新型色谱填料。在颗粒内部形成了大型流通孔道(Flow-through Pore),可实现进入颗粒内部的对流传输。因此,其特别适用于病毒和 VLP(病毒样颗粒)等大型生物分子的吸附与纯化。

Cellufine MLP™ 的表面及孔结构

Surface
Cross-section
  • Cellufine MLP™ 在颗粒表面及内部均具有大型孔结构。
  • 颗粒内部贯通孔的孔径约为 5~6 μm。 (采用压汞法测定)

整体柱(Monolith)色谱柱的优势比较

Cellufine MLP™ 兼具填充色谱柱的灵活性和整体柱(Monolith)色谱柱般优异的传质性能。

  • 兼容传统色谱柱设备。
  • 可轻松放大至生产规模的纯化工艺。
  • 非常适用于大规模生物工艺的纯化流程。
整体柱(Monolith)色谱柱 Cellufine MLP™
孔结构 大型贯通孔 大型贯通孔
形状 整体式 颗粒填充式
放大性能 有限 灵活兼容传统色谱柱
大规模生产运行 困难 容易
灵活性 较低 较高

整体柱(Monolith)色谱柱

Monolith column

Cellufine MLP™

Cellufine MLP™

优异的结合性能

Cellufine MLP™ 凭借具有大型贯通孔的孔结构,可使大分子高效进入颗粒内部。
在使用病毒颗粒(如杆状病毒)进行的性能评估中,Cellufine ML™ 相较于传统填料展现出更高的动态结合容量(DBC)。

Cross-section
色谱柱: ID 5 mm × 1.5 cm L (CV=0.29 mL)
流速: 0.5 mL/min
样品(24 mL):甲型流感病毒(H1N1),来源于 MDCK 细胞
清洗液(6 mL):10 mM 磷酸盐缓冲液 + 0.12 M NaCl
洗脱液(2.4 mL):10 mM 磷酸盐缓冲液 + 2.0 M NaCl

Cellufine MLP™ 优异的流速特性

Cellufine MLP™ 由具有相互连通孔结构的颗粒组成,流动相能够轻松渗透至颗粒内部的整个孔结构。因此,即使在高流速条件下运行,也不会产生显著的压降。

在本研究中,为最大限度地降低壁效应的影响,采用内径 10 cm 的色谱柱填装 Cellufine MLP™,并对压降进行了评估。结果表明,即使在线速度高达 600 cm/hr 的条件下,运行压力仍仅为 0.15 MPa。

这些结果表明,Cellufine MLP™ 具有区别于传统色谱填料的优异流速特性。

Cross-section
色谱柱: Axichrom100/300 (ID 10 cm)
柱高: 19.5 cm
装柱因子: 1.20
流动相:纯水

与传统 Cellufine™ 基质的比较

Cellufine™ 基质的 SEM 图像比较显示,不同产品具有各自独特的孔结构特征。Cellufine™ Sulfate 具有致密的孔结构,主要利用颗粒表面的吸附作用实现分离与纯化。Cellufine™ MAX 采用纤维状基质结构,凭借较大的比表面积展现出优异的蛋白质纯化性能。相比之下,Cellufine MLP™ 具有约 1,500 nm 的大孔径结构,专为疫苗、质粒 DNA、mRNA、外泌体等大型生物药物形式的纯化而优化设计。

Cellufine™ Sulfate

Cross-section

Cellufine™ MAX

Cross-section

Cellufine MLP™

Cross-section
Cellufine™ Sulfate Cellufine™ MAX Cellufine MLP™
孔径 (nm) < 5 100 1500
BET 比表面积(m²/g-干重) 0.1 ~ 0.2 100 ~ 150 10 ~ 30
特点 表面吸附 孔内的大容量结合位点 大型贯通孔
主要应用领域 病毒 蛋白质 病毒载体、外泌体、质粒 DNA(pDNA)和 mRNA

与传统 Cellufine™ 基质相比,Cellufine MLP™ 具有极大的孔径结构,更适用于病毒、质粒 DNA、mRNA 以及外泌体等大型生物颗粒的纯化,而不仅限于蛋白质的纯化。

内部孔结构的可及性

采用荧光微粒子(100 nm)进行的评价

将经染料(红色)染色的填料浸泡于含有 100 nm 荧光微粒子(绿色)的溶液中,并利用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察这些颗粒向填料内部孔结构扩散的过程。

传统 Cellufine™ 填料

Surface

Cellufine MLP™

Cross-section
  • 100 nm 纳米颗粒可扩散至 MLP 颗粒内部

应用

Cellufine MLP™ 是专为大型生物颗粒纯化而开发的色谱填料,可显著提升疫苗、病毒样颗粒(VLP)、腺相关病毒(AAV)、质粒 DNA、mRNA 以及外泌体等先进生物药物形式的纯化效率。

  • Influenza virus
    流感病毒
  • AAV
    AAV
  • Antibody
    抗体
  • Lentivirus
    慢病毒