疏水层析色谱填料(HIC)
Cellufine™ MAX Butyl,
Cellufine™ MAX Phenyl

  Cellufine™ MAX是第二代Cellufine填料,具有良好的高流动特性。 JNC为Cellufine MAX系列开发了一类新型高度交联的基球。Cellufine MAX疏水相互作用色谱现在拥有MAX Phenyl和Butyl两款填料。



图1. SEM电镜下的Cellufine MAX基球
  纤维素是一种天然多糖具有与非结晶多糖如琼脂糖不同的独特的结晶分子结构。因此,Cellufine具有独特的孔状结构,如图1所示。新型Cellufine MAX系列产品是所有Cellufine色谱填料中孔径最大的。这种孔状结构为Cellufine MAX HIC填料提供了卓越的机械强度和出色的物质移动性能。

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部分结构
疏水相互作用 Cellufine MAX Butyl

Cellufine MAX Phenyl
Cellufine MAX Phenyl LS



特点
特点
类型 Cellufine MAX Butyl Cellufine MAX Phenyl Cellufine MAX Phenyl LS
基质 高度交联的纤维素
粒径 40~130 μm
配基 丁基(Butyl) 苯基(Phenyl)
牛血清白蛋白吸附容量 (mg/ml) ≧ 9 ≧ 11 ≧ 4
牛血清白蛋白洗脱率 (%) > 70 > 35 > 65
多抗IgG的10% DBC (mg/ml) 17 30 19
工作压力 < 0.3 MPa
pH稳定性 pH 2 ~ 13
保存 20 % 乙醇

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标准模型蛋白的分离
 
层析柱: 6.6 mm ID x 50 mm L
缓冲液 A: 10 mM磷酸盐缓冲液 (pH 7)+1.5 M(NH4)2SO4
缓冲液 B: 10 mM 磷酸盐 (pH 7)
蛋白质: 核糖核酸酶 A, 溶菌酶, α-胰凝乳蛋白酶原 A

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标准模型蛋白的吸附能力
 
层析柱: 5 mm ID x 10 cm L
蛋白浓度: 1 mg/ml
缓冲液: 50 mM Tris-HCl (pH 8.5)

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Cellufine MAX Phenyl与盐浓度的动态结合容量关系
层析柱: 5 mm I.D. x 5 cm L
线速度:150 cm/hr
蛋白浓度: 1 mg/ml
缓冲液: 20 mM 磷酸盐 (pH7.0) + 硫酸铵

Cellufine MAX Butyl的动态吸附容量
 
层析柱: 5 mm I.D. x 5 cm L
流速: 0.5 ml/ min
蛋白浓度: 1 mg/ml
缓冲液: 10 mM 磷酸盐 (pH 7.0) +
2 M 硫酸铵 / BSA 牛血清白蛋白
1 M硫酸铵 / 多抗IgG

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压力与流量特性
 
层析柱:2.2cm I.D. x 20cmL
温度: 24±1℃
流动相: Water




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Cellufine MAX HIC的配基密度是可控的。例如,用Cellufine MAX Butyl去纯化HBsAg
  由于配基密度可控,Cellufine MAX HIC根据客户目的要求进行了优化。 图中显示的是Cellufine MAX Butyl LS(按HBV的要求進行了优化)和琼脂糖型丁基填料对重组乙型肝炎病毒颗粒的吸附 – 洗脱色谱图
 
  Cellufine MAX Butyl LS 琼脂糖丁基填料
上样量 163 (100) 163 (100)
流穿 48 (29) 50 (31)
洗脱 78 (48) 63 (39)
μg(%)

层析条件
HIC树脂: Cellufine MAX Butyl LS 琼脂糖丁基树
层析系统: AKTA explorer 10S
层析柱: Φ3.0 x 50 mm (vol. 0.35 ml)
样品: 150 mg of r-HBsAg (Beacle Inc.) in 0.02 M 磷酸盐, 0.6M 硫酸铵, pH 7.0
平衡和洗脱: 0.02 M 磷酸盐, 0.6M 硫酸铵, pH 7.0
洗脱1: 0.02 M 磷酸盐, pH 7.0
流速: 0.25 ml/min(220 cm/hr)

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化学及苛性条件下的稳定性
乙醇 (70%)   氢氧化纳 (0.5M)
异丙醇 (30%)   洗涤剂
盐酸胍 (6M)   高压灭菌 (121 ºC, 20 min)
尿素 (6M)      


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